中央空调冷却塔壁上生物膜：用洁净的工具在中央空调冷却塔壁4个点上刮取生物膜，将生物膜放在洁净的装有蒸馏水的玻璃瓶内，到实验室将生物膜打碎和震荡，检测方法同中央空调冷却塔水水样检测（注意：在现场取生物膜前应先取好现场水样，以避免生物膜内的军团菌混入冷却水中而影响结果）。
采样时记录当时气温，测量中央空调冷却塔水水温。
水样处理和检验将水样摇匀后静置15min，取450ml水用装有022m孔径滤膜的过滤器将水过滤。然后取下滤膜并剪碎，与5ml原水样混合并振荡35min；再从中取1ml水与等量pH20的001mol/L的盐酸液混合，静置510min后用003mol/L的氢氧化钾液（约02ml）中和至pH约69做酸处理。最后取01ml接种于GVPC琼脂（上海奥普生物医药有限公司提供，在BCYE琼脂基础上，加入甘氨酸、万古霉素、多粘菌素B和放线菌酮）平板上，用三角环推干后放入5CO2培养箱中，36孵育36d观察结果，挑取可疑菌落做鉴定。
军团菌的鉴定在GVPC琼脂平板上菌落形态符合，且血平板培养后不生长者，初步可认定为军团菌。再通过Gram染色涂片镜检和血清初筛（Oxoid，inc，包含21个军团菌血清型）、血清分型（嗜肺型LP多价血清及16、米克戴德军团菌单价分型血清为本中心自制）。最后对通过初步鉴定的菌株选取部分按文献方法做氧化酶、触酶、马尿酸盐水解、明胶液化、产棕色色素、胞内荧光、纸片法-内酰酶和无半胱氨酸BCYE琼脂等生化鉴定。
数据录入和分析所有数据经核对无误后，在Epidata中建立数据库，经数据转换后在EpiInfo中进行数据统计分析，运用Excel进行作图。
现场中央空调冷却塔水水样军团菌菌落数从5月开始随着月份增加军团菌菌落数逐渐递增，至8月达到高峰，然后菌落数呈现下降趋势。在2月、4月和11月份在中央空调冷却塔水中均未检测出军团菌。
中央空调冷却塔壁生物膜内军团菌菌落数在不同月份一直维持在一定水平，从2月开始随着月份增加军团菌菌落数逐渐递增，到8月份达到高峰，然后菌落数呈现递减趋势，总体呈现单峰。
采取中央空调冷却塔水样当时气温情况对中央空调冷却塔水军团菌检测当时的气温情况地点气温，气温随着时间改变呈现一个单峰趋势。
此外，目前所使用的大部分消毒剂之所以不能持久有效地消除或控制中央空调冷却塔水内的军团菌，可能其中原因之一是当消毒剂作用于中央空调冷却塔水中的军团菌时，尽管一部分军团菌被消毒剂杀死，但另一部分军团菌会渗透躲避到冷却塔壁上的生物膜内，冷却塔壁上的生物膜形成一个能抵挡消毒剂的保护外衣，使消毒剂无法达到生物膜内的军团菌消毒有效浓度，军团菌从而躲避消毒剂的消毒作用。此种假说尚需通过干预实验研究来验证。
因此，当前制定军团菌消毒控制措施的关键除了定期对冷却塔水进行消毒，还有要在不使用中央空调时将冷却塔清扫干净，更要注意塔壁上生物膜，将塔内冷却水排干，尽可能的去破坏军团菌赖以生存的生态环境。
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